- Druh veličiny: přítomnost/nepřítomnost fúzního genu BCR/ABL
- Materiál: nesrážlivá periferní krev, zkumavka s K-EDTA, příp. citrátem sodným
Filadelfský chromozóm (Ph), který vzniká reciprokou translokací dlouhých ramének chromozomů 9 a 22 – t(9;22)(q34;q11), patří k nejčastějším cytogenetickým aberacím u hematologických poruch. Výsledkem translokace je gen BCR/ABL, který slouží jako molekulární marker pro chronickou myeloidní leukémii (CML) - nachází se u 95 % případů CML. Gen BCR/ABL se nalézá asi u 5 % dětských a 25 % dospělých pacientů s akutní lymfatickou leukémií (ALL), kde má přítomnost tohoto genu prognostický význam. Fúzní gen se rovněž vyskytuje u malé části nemocných (asi 2 %) pacientů s akutní myeloidní leukémií (AML).
Stabilita
20-25 °C: 6 hod.Odběr
2-5 ml nesrážlivé periferní krve. Sklo nebo plast s protisrážlivou úpravou (K-EDTA, citrát sodný).
!Neodebírat do lithium heparinu!
Na molekulární úrovni fúzí protoonkogenu ABL a BCR vzniká abnormální gen, jehož translačním produktem je konstitutivně aktivní cytoplazmatická bcr-abl tyrozinová kináza, která narušuje řadu signálních drah a způsobuje leukemický fenotyp buňky. Abnormální fúzní gen vede k expresi tří typů transkriptů. Zatímco zlomové místo v genu ABL je nejčastěji před exonem a2, ke zlomům v genu BCR dochází na třech místech, v oblasti nazývané major (M-bcr) a méně často v intronech oblastí minor (m-bcr) a mikro (µ-bcr). V oblasti major je druhý exon (a2) genu ABL připojen buď k exonu b2 (b2a2), nebo exonu b3 (b3a2) genu BCR. Produktem genu je fúzní protein o molekulové hmotnosti 210 kD, označovaný jako p210, který je typický pro CML. Při zlomu v oblasti minor, se stává součástí fúzního genu první exon (e1), který je úsekem genu BCR. Fúzní gen se označuje e1a2 a produkuje fúzní protein p190, který je častý u Ph-pozitivní ALL a může se vyskytovat vzácně u CML. V oblasti mikro genu BCR dochází ke spojení mezi 19. exonem genu BCR a druhým exonem a2 genu ABL (e19a2 či c3a2), čímž vzniká fúzní protein p230.
V naší laboratoři provádíme detekci všech tří možných variant fúzního genu BCR/ABL (M-bcr, m-bcr a µ-bcr) pomocí reverzní transkripce izolované RNA do cDNA a následné multiplex PCR.
Indikace k vyšetření na přítomnost fúzního genu BCR/ABL:
- potvrzení diagnózy, určení prognózy a nastavení léčby u CML a ALL
- identifikace pacientů, u kterých po transplantaci kostní dřeně přetrvávají nebo se znovu objevily leukemické buňky
Poznámka: není nutno být na lačno
Doba odezvy: 14 dní
Poznámka k odběru:
- nesrážlivá periferní krev, zkumavka s K3EDTA, příp. citrátem sodným
- nechladit, nemrazit, uchovávat při pokojové teplotě, odeslat do laboratoře v den odběru
- páteční odběry nutno předem domluvit s pracovníky LMB (571 666 901, 602 592 024)
Referenční hodnoty
negativní = přítomnost fúzního genu BCR/ABL nebyla potvrzena
pozitivní = přítomnost fúzního genu BCR/ABL byla potvrzena