- Druh veličiny: přítomnost/nepřítomnost aneuploidie chromozomů 13, 18, 21, X a Y
- Materiál: plodová voda nebo choriové klky spolu se stěrem bukální sliznice matky
Metoda QF-PCR (kvantitativní fluorescenční PCR) umožňuje rychlou prenatální detekci nejčastějších aneuploidií (chromozomů 13, 18, 21, X a Y) pomocí vysoce polymorfních STR markerů specifických pro každý chromozom.
Stabilita
4-8 °C, nutno dopravit do laboratoře co nejdříve po odběruOdběr
Plodová voda – 2-4 ml do sterilní zkumavky, pokud možno bez kontaminace mateřskou krví
Choriové klky – nejméně dva klky z různých míst choria (cca 10-20 mg), aby bylo minimalizováno riziko stanovení chybné diagnózy z důvodu placentárního mozaicizmu, odběr proveďte do sterilních nádobek s transportním médiem
Stěr z bukální sliznice – je odebrán pacientce před invazivním výkonem (CVS, AMC), aby bylo možno porovnat alelický profil matky a plodu, případně vyloučit kontaminaci vzorku plodové vody mateřskou tkání
Klinické aplikace:
Těhotné se zvýšeným rizikem chromozomálních abnormalit u plodu (vyšší věk, pozitivní biochemický screening, UZ abnormality plodu) podstupují odběr choriových klků (CVS) nebo plodové vody (AMC). Většina chromozomálních abnormalit plodu vzniká v důsledku početních odchylek chromozomů 13, 18, 21, X a Y. Tyto aneuploidie jsou zároveň příčinou postnatálních syndromů: Downův syndrom (trizomie chr. 21), Patauův syndrom (trizomie chr. 13), Edwardsův syndrom (trizomie chr. 18), syndrom Turnerové (monozomie chr. X) a Klienefelterův syndrom (47, XXY). Konvenčním diagnostickým postupem je kultivace buněk s následnou karyotypizací, která si vyžádá zhruba 2-3 týdny.
Metoda QF-PCR (kvantitativní fluorescenční PCR) umožňuje rychlou prenatální detekci nejčastějších aneuploidií (chromozomů 13, 18, 21, X a Y) pomocí vysoce polymorfních STR markerů specifických pro každý chromozom. Vzorek DNA získaný z plodové vody nebo CVS je amplifikován pomocí PCR s fluorescenčně značenými primery, takže produkty lze separovat a kvantifikovat na automatickém genetickém analyzátoru.
Metoda zcela nenahrazuje konvenční cytogenetickou analýzu, protože nezahrnuje vyšetření celého karyotypu, ale vzhledem k tomu, že není nutné vycházet z kultivovaných buněk, je hlavní výhodou rychlost této metody. Obvyklá doba vydání výsledku je do 24 až 48 h, což umožní zmírnit stres u matek, případně prodloužit interval pro rozhodování o dalším osudu těhotenství. Ve srovnání s metodou FISH test QF-PCR může odhalit případnou mateřskou kontaminaci vzorku a vyžaduje menší množství materiálu.
Indikace k vyšetření:
- riziko prodlení při kultivaci plodové vody (AMC po 21. týdnu těhotenství)
- vysoké riziko chromozomálních aberací plodu (pozitivní biochemický screening nebo abnormality na UZ vyšetření)
- vrozená srdeční vada plodu
- vysoký psychický stres těhotné
Poznámka: není nutno být na lačno
Doba odezvy: 48 hodin
Referenční hodnoty
normální diploidní sada chromozomů 13, 18, 21 a pohlavních chromozomů